DNase I (脱氧核糖核酸酶I)，即Deoxyribonuclease I，是一种可消化单链或双链DNA的脱氧核糖核酸内切酶，它识别并切割磷酸二酯键，产生5’端为磷酸基团，3’端为羟基的单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸。适用于RNA提取、体外转录、RT-PCR实验中DNA的去除，DNase I 印迹(DNase I footprinting)，缺口平移(nick translatioin)， DNA随机片段文库构建等分子生物学实验。